Održivi komplet za testiranje endotoksina rFC - Pouzdano BET testiranje od dobavljača i tvornica iz Kine
Tehničke informacije o fluorometrijskom testu rekombinantnog faktora C (rFC) za detekciju bakterijskog endotoksina
rFC fluorometrijski test je in vitro metoda za kvantitativnu detekciju bakterijskog endotoksina (lipopolisaharida, LPS) bez upotrebe potkovičastih rakova, u skladu s globalnim farmakopejama (USP , EP 2.6.14). Njegov osnovni princip oslanja se na rekombinantni Faktor C (rFC) - rekombinantni protein konstruiran iz LPS-vezujućeg domena Faktora C potkovičastih rakova - eliminirajući ovisnost o prirodnoj krvi potkovičastih rakova i rješavajući probleme održivosti.
1. Princip ispitivanja
Endotoksin LPS se specifično veže za domen prepoznavanja LPS-a rFC-a, pokrećući konformacijsku promjenu koja aktivira aktivnost serinske proteaze rFC-a. Intenzitet fluorescencije AMC-a je direktno proporcionalan koncentraciji endotoksina u uzorku, mjerljivoj pomoću čitača fluorescentnih mikroploča.
2. Ključni tehnički parametri
- Osjetljivost: Detektira endotoksine u koncentracijama niskim i do 0,005 EU/mL, što je jednako ili čak premašuje tradicionalne testove Limulus Amebocyte Lysate (LAL).
- Linearni raspon: Tipično pokriva 0,005–50 EU/mL, omogućavajući kvantitativnu analizu u širokom spektru koncentracija.
- Specifičnost: Pokazuje visoku specifičnost za LPS; ne aktiviraju ga (1→3)-β-D-glukani (uobičajena interferencija u LAL gel-clot testovima), što smanjuje lažno pozitivne rezultate.
- Uslovi inkubacije: Zahtijeva kontroliranu temperaturu (37±1°C) i vrijeme inkubacije (60–120 minuta), s fluorescentnim mjerenjem na valnim dužinama pobude/emisije od ~360 nm/~460 nm.
3. Pregled radnog toka
- 1Pripremite uzorke (npr. farmaceutske proizvode, medicinske uređaje, biološke proizvode) putem razrjeđivanja ili ekstrakcije kako biste uklonili interferenciju matrice.
- 2Pomiješajte rFC reagens, fluorogeni supstrat i uzorak u jažici mikroploče.
- 3Inkubirajte na 37°C kako biste omogućili vezivanje LPS-rFC-a, aktivaciju i cijepanje supstrata.
- 4Izmjerite intenzitet fluorescencije; izračunajte koncentraciju endotoksina koristeći standardnu krivulju generiranu s poznatim standardima endotoksina (npr. Escherichia coli O55:B5 LPS).
Ovaj test kombinuje održivost (bez izlova potkovičastih rakova), pouzdanost (niska interferencija, visoka ponovljivost) i efikasnost, što ga čini idealnim za kontrolu kvaliteta u farmaceutskoj i biotehnološkoj industriji.
Često postavljana pitanja (FAQ)
Šta je test rekombinantnog faktora C (rFC)?
rFC test je moderna, in vitro metoda bez potkovičastih rakova koja se koristi za kvantitativno otkrivanje bakterijskih endotoksina (lipopolisaharida). Služi kao ekološki prihvatljiva alternativa tradicionalnim LAL testovima.
Da li je rFC test u skladu s međunarodnim farmakopejama?
Da, rFC fluorometrijski test je priznat i usklađen s glavnim globalnim farmakopejama, uključujući USP i EP 2.6.14, za testiranje endotoksina.
Koliko je osjetljiv rFC fluorometrijski test?
Test je visoko osjetljiv i sposoban je detektovati bakterijske endotoksine u koncentracijama niskim i do 0,005 EU/mL, što odgovara ili premašuje performanse tradicionalnih LAL metoda.
Da li rFC test daje lažno pozitivne rezultate na glukane?
Ne. Za razliku od tradicionalnih LAL testova, rFC test pokazuje visoku specifičnost za LPS i ne aktivira ga (1→3)-β-D-glukani, što značajno smanjuje lažno pozitivne rezultate.
Koji su standardni parametri inkubacije za test?
Test zahtijeva inkubaciju na kontroliranoj temperaturi od 37±1°C tokom 60 do 120 minuta. Intenzitet fluorescencije se potom mjeri na talasnim dužinama od približno ~360 nm (ekscitacija) i ~460 nm (emisija).