Rješenje za validaciju uklanjanja pirogena korištenjem peći za sterilizaciju suhom toplinom i indikatora endotoksina
Rješenje za Pirogen Validacija uklanjanja korištenjem peći za sterilizaciju suhom toplinom i indikatora endotoksina
BETMATCilj validacije
U ovoj validaciji, peć se koristi za simuliranje procesnih uslova sterilizacija suhom toplinomU kombinaciji s indikatorima endotoksina, potvrđeno je da specifični postupak sterilizacije suhom toplinom može učinkovito ukloniti pirogene (uglavnom bakterijske endotoksine) iz predmeta koji se steriliziraju (kao što su predmeti otporni na toplinu, uključujući stakleno posuđe i metalni pribor), osiguravajući da sadržaj endotoksina u steriliziranim predmetima ispunjava zahtjeve.
Ovaj protokol se primjenjuje na validaciju sterilizacije suhom toplinom i uklanjanja pirogena za pribor otporan na visoke temperature (npr. staklene šprice, inokulacijske petlje od nehrđajućeg čelika) korištenjem peći s cirkulacijom vrućeg zraka za sterilizaciju suhom toplinom pod specifičnim procesnim parametrima (temperatura, vrijeme, itd.). Indikator endotoksina koji se koristi u procesu validacije je bočica za izazivanje endotoksina (indikator endotoksina) s nivoom endotoksina ≥1000 EU/bočica od BETMAT Biotechnology, kataloški broj ECV1K.
Priprema prije validacije
3.1 Priprema osoblja
1. Formirajte tim za validaciju i razjasnite odgovornosti svakog člana. Tim uključuje osoblje za osiguranje kvalitete (QA), osoblje za kontrolu kvalitete (QC), tehničko osoblje za proizvodnju i osoblje za upravljanje opremom.
2. Provesti obuku za članove validacijskog tima. Sadržaj obuke obuhvata principe sterilizacije suhom toplinom i uklanjanja pirogena, postupke rada peći, metode korištenja indikatora endotoksina, sadržaj protokola validacije i relevantne regulatorne zahtjeve (npr. GMP). Nakon obuke, provest će se procjena kako bi se osiguralo da članovi imaju sposobnost da završe posao validacije.
3.2 Priprema opreme i pribora
1. Pećnica: Potvrdite da je pećnica završila Kvalifikaciju opreme (IQ, OQ) i da njene performanse ispunjavaju zahtjeve. Provjerite da li komponente kao što su sistem za kontrolu temperature pećnice, ventilator za cirkulaciju i sistem za odvod vlage rade normalno. Kalibrirajte temperaturne senzore pećnice, osiguravajući da je certifikat o kalibraciji unutar roka važenja i da tačnost kalibracije ispunjava zahtjeve validacije (npr. ±1℃).
2. Indikatori endotoksina: Kupujte indikatore endotoksina od kvalifikovanih dobavljača. Provjerite da li je ambalaža neoštećena i neoštećena, da li su etikete jasne (uključujući informacije kao što su nivo endotoksina, broj serije i datum isteka), čuvajte ih u skladu sa uslovima navedenim u uputstvu za upotrebu proizvoda (hlađenje na 2-8℃) i vodite odgovarajuću evidenciju skladištenja.
3. Ostali pribor: Pripremite LAL (Limulus Amebocyte Lysate) reagense potrebne za testiranje endotoksina, kalibrirane uređaje za snimanje temperature, tajmere itd. Sav pribor mora biti potvrđen kao apirogen.
3.3 Priprema dokumenata
1. Prikupite dokumente kao što su priručnik za opremu pećnice, certifikati o kalibraciji i evidencija o održavanju.
2. Nabavite priručnik za proizvod i certifikat o analizi indikatora endotoksina.
3. Razviti Standardnu operativnu proceduru (SOP) za testiranje endotoksina, kojim se specificiraju metode, koraci i kriteriji za procjenu rezultata testiranja endotoksina.
4. Pripremite obrasce za odobrenje protokola validacije i obrasce za evidenciju validacije (npr. zapise o raspodjeli temperature peći, zapise o postavljanju i prikupljanju indikatora endotoksina, zapise o testiranju endotoksina).
karakteristike
-
4.1 Ispitivanje distribucije toplote bez opterećenja
1. Cilj: Potvrditi ujednačenost raspodjele temperature u različitim dijelovima pećnice u uvjetima bez opterećenja, osigurati da nema očiglednih temperaturnih mrtvih zona i pružiti osnovu za naknadnu validaciju s opterećenjem.
2. Koraci rada
● Rasporedite sonde temperaturnog rekordera razumno u skladu s veličinom i strukturom pećnice. Tipično, sonde se postavljaju u gornji, srednji i donji sloj pećnice, te na prednji, srednji, stražnji, lijevi i desni položaj svakog sloja kako bi se osigurala pokrivenost cijelog efektivnog radnog područja pećnice. Broj sondi ne smije biti manji od 9 (za velike pećnice, broj se može odgovarajuće povećati).
● Spojite snimač temperature na računar, postavite interval snimanja (npr. 1 minuta), pokrenite pećnicu i izvršite procese zagrijavanja, očuvanja toplote i hlađenja u skladu s unaprijed postavljenim parametrima procesa sterilizacije suhom toplinom (npr. 250℃ tokom 30 minuta).
● Pratite i snimajte podatke o temperaturi svake sonde u realnom vremenu tokom cijelog procesa. Zaustavite snimanje nakon što se pećnica ohladi na sobnu temperaturu.3. Procjena rezultata: Tokom faze očuvanja toplote, temperatura svih sondi mora biti u rasponu od ±3℃ od zadane temperature (specifični raspon odstupanja može se podesiti prema propisima ili zahtjevima proizvoda), a trajanje mora dostići zadano vrijeme očuvanja toplote. Ako je tako, test distribucije toplote bez opterećenja je kvalifikovan. Ako postoje područja gdje odstupanje temperature prelazi standard, analizirajte uzroke (npr. kvar cirkulatornog ventilatora, začepljenje zračnog kanala), poduzmite odgovarajuće korektivne mjere (npr. popravak ventilatora, čišćenje zračnog kanala) i ponovo provedite test distribucije toplote bez opterećenja dok se ne kvalificira.
-
4.2 Ispitivanje distribucije toplote i prodiranja toplote pod opterećenjem
1. Cilj: Potvrditi ujednačenost raspodjele temperature u različitim dijelovima pećnice kada se predmeti koji se steriliziraju u nju ubacuju i osigurati da toplina može efikasno prodrijeti do središnjih dijelova predmeta koji se steriliziraju, tako da svaki dio predmeta koji se steriliziraju može dostići specificiranu temperaturu i vrijeme sterilizacije.
2. Koraci rada
● Stavite predmete koji će se sterilizirati u pećnicu u skladu sa stvarnom metodom punjenja u proizvodnji (npr. puno punjenje, polovično punjenje, minimalno punjenje itd., uključujući najmanje puno punjenje i najgore uslove punjenja).
● Rasporedite sonde uređaja za snimanje temperature na različite pozicije predmeta koji se steriliziraju (npr. ključni dijelovi kao što su površina, unutrašnjost i uglovi) i reprezentativna područja u pećnici. Broj sondi ne smije biti manji od onog koji se koristi u testu bez opterećenja i osigurajte da se svaki ključni dio predmeta koji se steriliziraju prati sondom radi prodiranja topline.
● Pokrenite pećnicu, koristite je u skladu s unaprijed postavljenim parametrima procesa sterilizacije suhom toplinom i zabilježite podatke o temperaturi svake sonde u stvarnom vremenu.
● Nakon što je postupak sterilizacije završen i pećnica se ohladi na sobnu temperaturu, prestanite snimati, organizirajte i analizirajte podatke o temperaturi.3. Procjena rezultata: Tokom faze očuvanja toplote, raspodjela temperature u različitim dijelovima pećnice mora ispunjavati kvalificirane standarde testa distribucije toplote bez opterećenja, a temperatura središnjih dijelova predmeta koji se steriliziraju mora dostići postavljenu temperaturu sterilizacije i održavati specificirano vrijeme očuvanja toplote. Ako je tako, test distribucije toplote i prodiranja toplote pod opterećenjem smatra se kvalificiranim. Ako nije kvalificiran, prilagodite metodu opterećenja, optimizirajte parametre procesa ili provjerite performanse opreme i ponovo provedite test.
-
4.3 Test izazivanja endotoksina
1. Cilj: Koristiti indikatore endotoksina za simuliranje pirogena koji mogu biti prisutni na predmetima koji se steriliziraju i provjeriti da li postupak sterilizacije suhom toplinom može smanjiti endotoksin na siguran nivo (obično je potrebno da sadržaj endotoksina bude ispod 0,1 EU/mL, specifične vrijednosti određene prema zahtjevima proizvoda).
2. Koraci rada
● Priprema indikatora endotoksina: U skladu sa zahtjevima priručnika za indikatore endotoksina, odgovarajuće tretirajte indikatore endotoksina (npr. rastvaranje i razrjeđivanje; indikatori endotoksina od BETMAT Biotechnology mogu se koristiti direktno) kako biste osigurali tačnost i ujednačenost koncentracije endotoksina.
● Postavljanje indikatora endotoksina: Postavite indikatore endotoksina na pozicije s nižim temperaturama ili sporijim prodiranjem topline (tj. pozicije u najgorem slučaju) identificirane u testu distribucije topline pod opterećenjem i testu prodiranja topline, kao i na ključne dijelove predmeta koji se steriliziraju. Postavite najmanje 2 indikatora endotoksina na svaku tačku postavljanja. U međuvremenu, postavite pozitivne kontrole (nesterilizirane indikatore endotoksina) i negativne kontrole (LAL reagens voda) izvan pećnice.
● Proces sterilizacije suhom toplinom: Pokrenite pećnicu, izvršite operaciju sterilizacije u skladu s unaprijed postavljenim parametrima procesa sterilizacije suhom toplinom. Tokom procesa, zabilježite podatke o temperaturi u skladu sa zahtjevima testa distribucije topline i prodiranja topline kako biste osigurali da proces sterilizacije ispunjava zahtjeve procesa.
● Izvlačenje indikatora endotoksina: Nakon završetka postupka sterilizacije, izvadite indikatore endotoksina iz pećnice kada se pećnica ohladi na odgovarajuću temperaturu (npr. ispod 40℃) i pravilno ih označite kako biste izbjegli zabunu.
● Testiranje endotoksina: U skladu sa SOP-om za testiranje endotoksina, koristite LAL reagense za testiranje izolovanih indikatora endotoksina, pozitivnih kontrola i negativnih kontrola za endotoksin. Metode testiranja mogu uključivati gel-clot metodu ili fotometrijsku metodu. Za gel-clot metodu mogu se koristiti LAL reagensi sa osjetljivošću od 0,06 EU/mL. Za fotometrijsku metodu mogu se koristiti kompleti za testiranje endotoksina koji koriste kinetičku turbidimetrijsku metodu ili kinetičku hromogenu metodu.3. Procjena rezultata
● Negativna kontrola ne smije pokazivati endotoksinsku reakciju (npr. nema stvaranja gela kod gel-clot metode, vrijednost detekcije ispod granice detekcije kod fotometrijske metode), a pozitivna kontrola mora pokazivati očiglednu endotoksinsku reakciju (npr. stvaranje čvrstog gela kod gel-clot metode, vrijednost detekcije viša od praga koji odgovara koncentraciji pozitivne kontrole). Ako ne, rezultati testa su nevažeći i test endotoksinske provokacije treba ponovo provesti.
● Svi indikatori endotoksina tretiran sterilizacijom suhom toplinom ne smije pokazati endotoksinsku reakciju u testu, tj. sadržaj endotoksina je ispod specificiranog sigurnog nivoa. Ako je tako, test izazivanja endotoksinom je kvalifikovan, što ukazuje da postupak sterilizacije suhom toplinom može efikasno ukloniti pirogene. Ako bilo koji indikator endotoksina pokaže pozitivan rezultat testa, analizirajte uzroke (npr. nepravilno postavljanje indikatora endotoksina, nedovoljni parametri procesa sterilizacije, kvar opreme), poduzmite odgovarajuće korektivne mjere i ponovo provedite test izazivanja endotoksinom dok se ne kvalificira.
5.1 Procjena rezultata validacije
Sveobuhvatno procijenite rezultate testa distribucije toplote bez opterećenja, testa distribucije toplote i penetracije toplote pod opterećenjem, te testa izazivanja endotoksinom. Ako svi ispitivani elementi ispunjavaju unaprijed postavljene kvalifikovane standarde, trenutna validacija sterilizacije suhom toplotom i uklanjanja pirogena je kvalifikovana, a postupak sterilizacije suhom toplotom pećnice može se koristiti za uklanjanje pirogena iz specificiranih predmeta koji se steriliziraju. Ako bilo koji ispitivani predmet nije kvalifikovan, provedite istragu odstupanja, razvijte i implementirajte korektivne mjere i ponovo provedite relevantne testove dok svi predmeti ne budu kvalifikovani.
5.2 Priprema izvještaja o validaciji
Nakon završetka validacije, tim za validaciju će prikupiti i organizovati sve podatke i zapise o validaciji, te pripremiti izvještaj o validaciji. Izvještaj o validaciji će sadržavati sljedeći sadržaj:
1. Cilj, opseg i osnova validacije (relevantni propisi, standardi, SOP-ovi, itd.).
2. Članovi tima za validaciju i njihove odgovornosti.
3. Priprema prije validacije (obuka osoblja, priprema opreme i pribora, priprema dokumentacije, itd.).
4. Detaljni operativni koraci, podaci ispitivanja, analiza rezultata i procjena za svaku stavku validacije.
5. Odstupanja (ako ih ima): Detaljan opis odstupanja koja se javljaju tokom procesa validacije, uključujući vrijeme, lokaciju, fenomen odstupanja, analizu uzroka, korektivne mjere i učinak implementacije.
6. Zaključak validacije: Jasno navedite da li je postupak sterilizacije suhom toplinom kvalifikovan i da li se može koristiti za uklanjanje pirogena iz specificiranih predmeta koji se steriliziraju.
7. Preporuke: Na osnovu rezultata validacije, predložiti preporuke za naknadno održavanje, ciklus ponovne validacije itd.
8. Dodaci: Uključujući obrasce za odobrenje protokola validacije, različite obrasce za evidenciju validacije, certifikate o kalibraciji opreme, priručnike za indikatore endotoksina, izvještaje o testiranju endotoksina itd.
Nakon pripreme izvještaja o validaciji, on će biti pregledan i odobren u skladu s procesom odobravanja dokumenata kompanije. Odobreni izvještaj o validaciji će biti arhiviran i njime će upravljati odjeljenje za osiguranje kvaliteta.
6.1 Ponovna validacija
1. Ponovna validacija sterilizacije suhom toplinom i uklanjanja pirogena provodi se pod sljedećim okolnostima:
● Veće održavanje ili modifikacija peći (npr. zamjena cijevi za grijanje, ventilatora za cirkulaciju, sistema za kontrolu temperature itd.).
● Značajne promjene u vrsti, specifikaciji ili načinu punjenja predmeta koji se steriliziraju.
● Promjene parametara procesa sterilizacije suhom toplinom (npr. temperatura, vrijeme).
● Periodična ponovna validacija: Obično se provodi jednom godišnje. Specifični ciklus se može prilagoditi učestalosti korištenja pećnice, statusu održavanja i podacima o historiji validacije, ali ne smije biti duži od 2 godine.
2. Sadržaj ponovne validacije može se na odgovarajući način pojednostaviti ili prilagoditi prema specifičnim okolnostima, s fokusom na ključne stavke koje mogu utjecati na učinak sterilizacije (npr. test distribucije topline pod opterećenjem i test penetracije topline, test izazivanja endotoksinom).
6.2 Dnevno praćenje
1. Svaki put kada se peć koristi za sterilizaciju suhom toplinom i uklanjanje pirogena, operater mora raditi u skladu s postupcima rada pećnice i zabilježiti radne parametre pećnice (npr. temperaturu, vrijeme, status punjenja itd.).
2. Obavljajte redovno održavanje peći, čišćenje, podmazivanje, inspekciju i druge radove u skladu s planom održavanja opreme i vodite odgovarajuću evidenciju o održavanju.
3. Redovno kalibrirajte temperaturne senzore i snimače temperature peći kako biste osigurali da njihova tačnost ispunjava zahtjeve. Ciklus kalibracije treba provoditi u skladu s relevantnim propisima ili priručnikom za opremu (obično jednom svaka 3-6 mjeseci).
4. Provesti nasumično uzorkovanje steriliziranih predmeta za testiranje endotoksina kako bi se pratio učinak sterilizacije. Ako se utvrdi da je testiranje endotoksina nekvalifikovano, odmah prestati koristiti pećnicu, provesti istragu o odstupanjima i poduzeti korektivne mjere, te po potrebi provesti ponovnu validaciju.