Test rekombinantnog faktora C (rFC)
31.07.2025.
Test rekombinantnog faktora C (rFC)
BETMAT
Rekombinantni Test faktora C (rFC)
Test rekombinantnog faktora C (rFC) je moderna alternativa za detekciju bakterijskih endotoksina bez upotrebe životinja, koja nudi usporedivu osjetljivost i tačnost s tradicionalnim testovima Limulus Amebocyte Lysate (LAL). Ovaj test koristi rekombinantni faktor C, genetski modificirani protein dobiven iz prirodnog faktora C potkovičastog raka, kako bi se pokrenuo fluorescentni signal kao odgovor na endotoksine.
-
Aktivacija endotoksinom
Rekombinantni faktor C se aktivira vezivanjem za bakterijski endotoksin (lipopolisaharid, LPS). -
Cijepanje fluorescentnog supstrata
Aktivirani Faktor C cijepa sintetički fluorogeni supstrat, oslobađajući fluorescentni signal. -
Kvantifikacija
Intenzitet fluorescencije je direktno proporcionalan koncentraciji endotoksina u uzorku. Fluorescencija se mjeri fluorometrom, a nivoi endotoksina se određuju pomoću standardne krive generirane s poznatim koncentracijama.
Prednosti rFC testa
-
Bez životinja
Eliminira potrebu za potkovičastim rakovima, promovirajući održivost i etičke prakse testiranja.
-
Visoka specifičnost i osjetljivost
Precizno detektuje nivoe endotoksina, uporedivo sa tradicionalnim LAL testovima.
-
Robusnost
Smanjena varijabilnost u poređenju sa biološkim testovima koji koriste lizat.
-
Isplativo
Može smanjiti ovisnost o sezonskom sakupljanju i obradi prirodnog lizata.
Postupak
Priprema uzorka
Uzorci za testiranje se razrjeđuju u vodi ili puferu bez endotoksina, a zatim miješaju s rFC reagensom.
Inkubacija reakcije
Smjesa se inkubira na kontroliranoj temperaturi, što omogućava da se reakcija dogodi.
Mjerenje fluorescencije
Intenzitet fluorescencije se mjeri na specifičnim talasnim dužinama koje odgovaraju korištenom fluorogenom supstratu.
Analiza podataka
Standardna krivulja, generirana iz poznatih koncentracija endotoksina, koristi se za izračunavanje nivoa endotoksina u testnim uzorcima.
BETMATAplikacije
Detekcija endotoksina u farmaceutskim proizvodima, biološkim lijekovima, medicinskim uređajima i injekcijskim otopinama.
Kontrola kvaliteta u proizvodnim pogonima uz pridržavanje regulatornih zahtjeva za ograničenja endotoksina.
rFC test se sve više primjenjuje u industrijama koje daju prioritet održivosti i usklađenosti sa smjernicama za dobrobit životinja, uz održavanje strogih standarda za detekciju endotoksina.